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■ 制品內(nèi)容
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Code No.:RR02MA
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TaKaRa LA Taq (5 U/μl)
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25 μl
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Plus)
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1 ml
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dNTP Mixture (2.5 mM each)
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400 μl
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Code No.:RR002A
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TaKaRa LA Taq
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125 U
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Free)
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1 ml
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dNTP Mixture (2.5 mM each)
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400 μl
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MgCl2 (25 mM)
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1 ml
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Code No.:RR52A
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TaKaRa LA Taq (5 U/μl)
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25 μl
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Plus)
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1 ml
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Code No.:RR52AM
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TaKaRa LA Taq (5 U/μl)
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25 μl
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10×LA PCR Buffer II (Mg2+ Free)
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1 ml
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MgCl2 (25 mM)
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1 ml
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■ 制品說明
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本制品是應(yīng)用LA PCR原理研制的具有3′→5′Exonuclease活性 (Proof reading活性) 的耐熱性DNA聚合酶。無論是擴(kuò)增短鏈DNA還是長(zhǎng)鏈DNA，其效率都優(yōu)于其它同類產(chǎn)品，尤其在擴(kuò)增大于10 kb的DNA片段方面，其優(yōu)勢(shì)更加明顯，而且保真性能強(qiáng)。
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■ 保存
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-20℃。
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■ 活性定義
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用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，在74℃、30分鐘內(nèi)，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個(gè)活性單位 (U)。
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■ 純度
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25 U的本酶和1 μg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反應(yīng)1小時(shí)，未檢出內(nèi)切酶和外切酶活性。
25 U的本酶和1 μg的λ-Hind III、或1 μg的λ DNA在74℃下反應(yīng)16小時(shí)，均未檢出內(nèi)切酶和外切酶活性。
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■ 用 途
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PCR法擴(kuò)增DNA。尤其適用于15 kb以上DNA片段的擴(kuò)增。
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■ PCR產(chǎn)物
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使用本制品擴(kuò)增得到的大部分PCR產(chǎn)物3′端附有一個(gè)“A”堿基，因此可直接克隆于T-Vector中。但克隆片段過長(zhǎng) (大于5 kb) ，TA克隆效率將會(huì)降低。也可以將PCR產(chǎn)物進(jìn)行末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端載體中。
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■ PCR反應(yīng)性能
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1. 以λ DNA為模板，可以很好地?cái)U(kuò)增20 kb和35 kb的DNA片段。
2. 以人基因組DNA為模板，可很好地?cái)U(kuò)增17.5 kb (β-Globin gene) 的DNA片段。
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