本制品是采用TB Green嵌合熒光法進行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應的最適濃度TB Green,是一種2X 濃度的Premix Type試劑,進行實驗時,PCR反應液的配制十分方便簡單。
本制品通過添加輔助蛋白質和對Buffer組份的改良,使反應特異性比TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)
更高。特別對影響嵌合法的主要因素的引物二聚體的產生有明顯抑制作用。本制品建議使用3 Step PCR作為標準流程,3 Step
PCR反應時間稍長,但能有效抑制非特異性的PCR擴增。
本制品對微量模板濃度也有很高的靈敏度,可以在寬廣的定量區域內得到良好的標準曲線,對靶基因進行準確定量檢測,重復性好,可信度高。
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■ 保存
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4℃保存6個月。
避光保存,避免污染。
長期保存請置于-80℃,勿存于-20℃。產品融解后請于4℃保存并在6個月內用完。
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■ 試劑盒特長
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1. 適用于Real Time PCR反應,可以快速、準確地對目的基因進行檢測、定量。
2. 在2X 濃度的Premix中,預先混有TB Green,PCR反應液配制時,只需加入模板、引物、滅菌水便可進行Real Time PCR反應,操作簡單方便。
3. DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以進行Hot Start法PCR反應,有效防止熱循環反應前由引物非特異性退火引起的非特異性擴增。同時制品中還添加了輔助蛋白,可以進一步抑制PCR反應中由于引物的非特異性退火或引物二聚體等引起的非特異性擴增。
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■ 使用注意
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1. 使用時請上下顛倒輕輕均勻混合,避免產生氣泡,防止因混合不均勻造成的反應不足。
a) 請勿渦旋振蕩混勻。
b) TB Green Premix DimerEraser (2X conc.) 在-80℃存放可能會產生白色或淡黃色的沉淀,可用手掌溫度緩慢溶解于室溫避光放置,輕柔的上下顛倒混勻直至沉淀全部消失。
c) 沉淀會導致溶液成分不均一,使用前務必充分混勻試劑。
2. 請于冰上配制反應試劑。
3. 本制品中含有熒光染料TB Green,保存制品或配制PCR反應液時應避免強光照射。
4. 反應液的配制、分裝請一定使用新的 (無污染的) 槍頭、Microtube等,盡量避免污染。
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